Il rappresenta una delle attrazioni più esclusive fra i tesori artistici della città di Firenze. Un vero capolavoro di architettura realizzato nel '500 in appena più di sei mesi. Un percorso aereo lungo più di 1 km fra palazzi, vie del centro storico della città e il fiume Arno.
In occasione del matrimonio del figlio di Cosimo, Francesco con Giovanna d'Austria, Cosimo decise di voler collegare con un varco sopraelevato Palazzo Vecchio, gli Uffizi e Palazzo Pitti, la nuova, spettacolare residenza cittadina dei Medici. In soli sei mesi Vasari fu in grado di progettare e realizzare quindi il Corridoio Vasariano anche noto come il Percorso del Principe, un lungo corridoio sopraelevato di oltre 1 km che collega con ponti aerei e passaggi segreti i 3 palazzi medicei. Il favoloso percorso avrebbe consentito al granduca di spostarsi senza essere visto tra palazzo Vecchio fino al Giardino di Boboli in modo indisturbato e raggiungere in sicurezza il Forte Belvedere.
Nel 1574 Vasari morì e i lavori del Palazzo degli Uffizi proseguirono sotto la direzione di Alfonso Parigi e Bernardo Buontalenti: quest'ultimo completò la realizzazione del palazzo raccordandolo anche con la Loggia dei Lanzi nel 1580.
Nel 1581 Francesco I, figlio di Cosimo ora al potere, decise di chiudere ed adibire la loggia dell'ultimo piano a galleria d'arte personale dove raccogliere la sua splendida collezione di dipinti quattrocenteschi e contemporanei, a cui si aggiungevano cammei, medaglie, pietre dure, statue antiche, opere di alta oreficeria, bronzetti, armature, miniature. In un secondo momento Francesco I rese la collezione visitabile su richiesta. Questo fa degli Uffizi uno dei più antichi musei d'Europa.
Nel 1583 Francesco I fece trasformare la terrazza, sopra la Loggia dei Lanzi, in un giardino pensile, ora scomparso, dove la corte si riuniva per ascoltare esibizioni musicali ed altri intrattenimenti.
Per dare lustro e prestigio alla collezione medicea, nel 1584 Buontalenti edificò la Tribuna nel braccio lungo degli Uffizi traendo ispirazione dalla Torre dei Vento di Atene, descritta da Vitruvio nel primo libro De Architectura. La Tribuna è un ambiente ottagonale, dall'atmosfera ovattata ed avvolgente, con un pavimento intarsiato da marmi policromi, pareti foderate di velluto rosso e un soffitto a cupola completamente incrostato da seimila conchiglie di madreperla dell'Oceano Indiano che scintillano su un fondo di lacca rosso cremisi.
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La Galleria degli Uffizi ospita la più vasta collezione di dipinti dal periodo romanico al XVIII secolo. Ancora oggi gli Uffizi ospitano celebri capolavori esposti in ordine cronologico